بررسی اثرایمنومدولاتوری پروتئین های خارج و داخل سلولی کاندیدا آلبیکنس در موش های مبتلا به سرطان پستان

امروزه تعداد بیماران مبتلا به سرطان سینه رو به افزایش است. تومورها، توده مستقلی از سلولها نیستند بلکه بیشتر عملکردی شبه ارگانی دارند وتحت تاثیر محیط اطراف خود و بویژه microenvirnoment پیرامونشان میباشند. این تاثیرات متقابل پدیده ای دینامیک است که هم در آغاز و هم در پیشرفت تومورنقش دارد. در این مطالعه اثرات ایمنومدولاتوری پروتئین های خارج و داخل سلولی کاندیدا آلبیکنس در موش های مبتلا به سرطان پستان بررسی شد. همچنیین اثرات کاندیدا آلبیکنس (سلول کامل - whole protein)، زایموزان مستخرج ازدیواره سلولی کاندیدا البیکنس وفراکشن 14 کیلو دالتونی سیرکهنه در موش های توموری، مورد ارزیابی گرفت. بطور خلا صه به هفت گروه از موشهای balb/c بالغ، تومور سرطان سینه به صورت زیر جلدی پیوند زده شد. بعد از بالا آمدن تومور، فراکشن های تهیه شده (پروتئین کاندیدا، پروتئین 14کیلو دالتونی سیر کهنه، زایموزان)و همچنین سلول کامل کاندیدا آلبیکنس بطور داخل پریتونال داده شد. موشهای توموری گروه اول، کاندیدا آلبیکنس گروه دوم، پروتئین، گروه سوم زایموزان، گروه چهارم پروتئین 14کیلو دالتونی سیر دریافت کردند در گروه پنجم فراکشن های زایموزان وسیر تواماتزریق شد. ودر نهایت گروه های ششم وهفتم به ترتیب لیونازول و pbs گرفتند. اندازه توموربا استفاده از کولیس ورنیه (با دقت 0.01) اندازه گیری شد. در نهایت موشها کشته شده ودر صد سلولهای t-regs ارتشاح یافته به تومور با تکنیک فلوسایتومتری(bd, usa) بدست آمد.برای سنجش ifn?، il-4 وماتریکس متالوپروتئیناز هاmmp-3)، (mmp-9 از تست الیزا استفاده گردید. ]عصاره ابی سیر کهنه به روشی که ماینس وهمکاران شرح داده بودند تهیه شد.سپس پروتئین های موجود در این عصاره با استفاده از سولفات آمونیوم رسوب داده شد. و پروتئین14 kd ا استفاده از تکنیک ژل فیلتراسیون و سفادکس g 50 تخلیص گردید.برای تخلیص زایموزاان، مخمر کاندیدا آلبیکنس پس از کشت، جمع آوری گر دید.دیواره سلولی مخمر بعد از شکستن، سانتریفیوژو شستشوی مکرردرna2po4بصورت سوسپانسیون 5درصددر آمد. سوسپانسیون حاصل بمدت 3 ساعت در آب جوش قرار گرفت وبا آب و الکل مطلق شسته شد. ودر انتها محصول بدست آمده بصورت پودر لیوفیلیزه درآمد[. نتایج حاصل نشان داد که فراکشن زایموزان حدودا معادل 8/1 درصدوزن خشک مخمراولیه بود.این فراکشن توانایی توقف کمپلمان را داشت. نتایج تست l.a.lموید وجود بخش پلی ساکاریدی گلوکان بود.نتایج فلو سیتومتری نشان داد که زایموزان و پروتئین های کاندیدا می توانند درصدسلولهایt-regرادر استرومای بافت توموری کاهش دهند(pvalue?0.05) در حالیکه کاندیدا البیکنس درصد cd4+ cd25+ foxp3 را افزایش داد((pvalue?0.05. کاندیدا در مقایسه با تمامی گروه ها میزانmmp-3 pvalue?0.05)) و (pvalue?0.001) mmp-9) را افزایش داد. در گروه اول یعنی موش های توموری گیرنده کاندیدا آلبکنس حجم تومور بطورمعنی داری نسبت به تمامی گروه ها افرایش یافت در حالیکه در گروه سوم یعنی موش های توموری گیرنده زایموزان حجم تومورکاهش یافت (pvalue?0.05). علاوه براین زایموزان و پروتئین میزان تولید اینترفرون گاما را در کشت سلول های صحالی بطور معنی داری افزایش دادند(pvalue?0.001) در حالیکه کاندیداآلبیکنس این میزان را کاهش داد(pvalue?0.001)..پس از سایتو کاین اسی مشاهده شد که درگروه سوم یعنی موشهای گیرنده زایموزان میزان تولیدil-4 بطور معنی داری کاهش یافته است(pvalue?0.05) در صورتیکه میزان آن درموشهای دریافت کننده کاندیدا آلبیکنس افزایش یافته است(pvalue?0.05).در نهایت میزان بقائ موشهای توموری نیز در گروه اول (گیرنده کاندیدا)در مقایسه با گروه کنترل بطور معنی داری کاهش یافت(pvalue?0.05). سرطان یک بیماری مولتی فاکتوریال است بنا براین نیاز به رویکردهای درمانی متعدد دارد.تجمع اولیه سلول هایt-reg در بافت توموری در ارتباط با پیشرفت بیماری است و به عنوان یکی از شاخص های پیش آگهی وخیم بیماری تلقی می شود. ار آنجائیکه براساس نتایج حاصل زایمو زان و whole proteinمی توانند درصد سلول های t-reg را کاهش دهند مصرف زایموزان در سرطان سینه توصیه می شود. زایموزان وwhole protein بطور موثری حجم تومور را کاهش داده وبا تاثیر در کاهش تولیدil-4 و افزایش ifn-? می تواند سیستم ایمنی را تقویت نماید. افزایش قابل ملاحظه حجم تومور، تاثیردرافزایش تولیدماتریکس متالوپروتئینازهای 3و9و کاهش میزان بقائ موش های توموری به وسیله کاندیدا آلبیکنس موید توانایی سرکوب پاسخ ایمنی توسط این مخمر است که می تواند در افزایش حجم تومور و پیشرفت و وخامت آن موثر باشد.